Glykopeptidsyntese

Glykopeptidsyntese|Glykosylerte peptider|O-Koblede glykopeptider|N-Koblede glykopeptider|Vitenskap-Peptid

Trenger du glykopeptider for forskning på glykobiologi eller glykoproteinmimicry?Science-PeptideGlycopeptide Synthesis-tjenesten dekker O-kobling, N-kobling og introduksjon av komplekse glykaner. 20 års erfaring, presis kontroll av glykosyleringssteder. Ta gjerne kontakt med oss.

Hvorfor lager du glykopeptider?
Proteiner er sjelden "nakne" i kroppen - de fleste bærer sukker. Glykosylering påvirker proteinfolding, stabilitet, gjenkjennelse og signalering. Hvis du vil studere funksjonen til et glykoprotein, eller utvikle et antistoff mot en glykanepitop, er det ikke nok å ha et nakent peptid, du må feste glykanene.

 

Vanskeligheten med glykopeptidsyntese ligger i den komplekse strukturen til selve glykankjeden og behovet for å sikre det korrekte stedet og integriteten til glykankjeden når den er festet til peptidet; O-konjugasjon er greit, men N-konjugerte glykankjeder er mye lengre, noe som gjør syntesevansker direkte doblet. Vi har tråkket inn i disse jettegrytene før, og vi vet hvordan vi skal komme oss rundt dem.

1. Glykosyleringstype: Både O- og N-koblinger lages

Avhengig av dine forskningsmål, vil vi presse hvilken glykosyleringsstrategi som er mest hensiktsmessig. Det første trinnet i glykopeptidsyntesen er å velge riktig sukkerkjede og kobling.

2. Sukkerkjedelengde: fra monosakkarider til komplekse sukkerkjeder
Monosakkaridmodifikasjon: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal, etc., enklest og mest vellykket.
Disakkarider/trisakkarider: f.eks. laktose, kitosan, må beskyttes godt av glykosyldonorer.
Komplekse sukkerkjeder: høy mannosetype, komplekse N-glykaner, opptil ni sukkerarter.
Sialylering: Den terminale koblingen til sialinsyre etterligner gjenkjennelsesstedet til naturlige glykoproteiner.

3. Punktkontroll: presisjon, ingen gjetting
Hva er den største frykten for glykosylering? Glykokonjugering på feil sted, eller det ene stedet er koblet til, men det andre stedet er ikke det. Med vår ortogonale beskyttelsesstrategi kan vi introdusere glykosylering på et spesifikt sted og la de andre stedene være intakte. Trenger du å glykosylere flere steder? Vi kan introdusere dem én etter én og kontrollere dem tydelig.

4. Renhet: Avhengig av eksperimentelle krav

Hvert glykopeptid er ledsaget av HPLC- og MS-rapporter, med data som støtter integriteten til glykankjeden og det riktige stedet.

5. Andre modifikasjoner på glykopeptider
Glykopeptider er komplekse nok alene, men noen eksperimenter krever noe annet:
Fluorescerende merking: FITC, TAMRA, sporing av glykopeptiddestinasjon.
Biotin: Trekk-ned eller test.
Fosforylering: Samtidig simulering av glykosylering og fosforylering for å studere krysstale.
Isotopmerking: for NMR eller massespektrometri kvantifisering.

1. Glykokjemi + peptidsyntese, to-tilnærming
Glykopeptidsyntese er vanskelig fordi den krysser to felt - glykokjemi og peptidsyntese. De som lager sukker kjenner kanskje ikke peptid, og de som lager peptid kjenner kanskje ikke sukker. Vi har folk på begge sider, vi forbereder glykosyldonoren selv, optimaliserer glykosyleringsforholdene selv, vi trenger ikke outsource, og vi kan justere problemene selv.

2. Fleksible beskyttelsesstrategier og integriteten til sukkerkjeden
Under glykosylering må selve sukkerkjeden beskyttes, ellers vil reaksjonsforholdene slå ut sukkeret. Vi har ulike kombinasjoner av beskyttelsesgrupper som kan stabilisere sukkerkjeden under peptidsynteseforhold, og deretter la sukkeret være intakt når det avbeskyttes i det siste trinnet.

3. Områdekontroll: koble til hvor du vil
Enkeltstedsglykosylering: Sukker introduseres på et spesifisert sted og etterlates nakent andre steder.
Glykosylering med flere-steder: forskjellige nettsteder kan bære forskjellige sukkerkjeder, som kan introduseres én etter én uten å forstyrre hverandre.
Selektiv glykosylering: det er flere Ser/Thr, bare én av dem er glykosylert - oppnådd ved konserveringsstrategi, ikke etter sannsynlighet.

4. QC: Er sukkerkjeden intakt? Er sidene riktige?
Glykopeptider er mer plagsomme med kvalitetskontroll enn vanlige peptider::

MS molekylvekt: du kan se om sukkeret er festet eller ikke ved å se på det.
MS/MS for å se stedet (valgfritt): bryte opp peptidet for å se hvilken aminosyre sukkeret er knyttet til.
HPLC for å se renheten: Se også etter urenheter ved avsukkerisering.
Sukkersammensetningsanalyse: Måling av sukkerkjedesammensetning og koblinger ved behov.
Dataene for hvert glykopeptid er gitt til deg, så du trenger ikke å gjette.

5. Fra milligram til hundre milligram, helt til slutten
Milligram for screeningsfasen, ti milligram for valideringsfasen, hundre milligram for den strukturelle studien - vi kan ta alt. Det samme prosjektet, det samme motstykket, ingen grunn til å re-harmonisere.

Strukturell biologi NMR/krystallstruktur av glykoprotein homogene sukkerkjeder, isotopmerking

• Levering: Lyofilisert pulver, sentrifugerør eller hetteglass, beskyttet av nitrogen.
• Medfølgende dokumenter: COA (HPLC-profil + MS-profil), MS/MS (bekreftelse av glykosyleringssteder).
• Valgfrie tester: peptidinnhold, endotoksin, fuktighet, sukkersammensetningsanalyse.
• Tilpasset emballasje: porsjonering og merking i henhold til dine krav.
• Hvert Glycopeptide Synthesis-produkt blir dobbelt-sjekket før det sendes ut for å sikre at sukkerkjeden er komplett og at sidene er korrekte.

Enten du vil ha enkle glykopeptider modifisert med monosakkarider, eller komplekse N-koblede glykaner, kan vi snakke. Du trenger i det minste ikke lete etter noen i begge ender når du ber Science-Peptide om å gjøre Glycopeptide Synthesis.

Jeg trenger at du forteller meg:
peptidsekvenser
Glykosyleringssteder og sukkerkjedestrukturer (referanser er best)
Hvor mye (milligram)
krav til renhet

Når vil du ha det?
Gi deg en mulighetsvurdering og tilbud innen 24 timer.