Tirzepatid Urenheter

Tirzepatid Urenheter|Tilpeptid Urenhetskontroll|Forurensning tilpasset syntese og strukturbekreftelse|Vitenskap-Peptid

Tirzepatide Urenheter kontroll - for GLP-1/GIP dobbel-medikamentkvalitetsforskning, generisk medikamentrapportering.Science-Peptide gir tilpasset syntese av tilpeptidrelaterte urenheter, inkludert slettingspeptider, oksiderte urenheter, fettsyreeksfolieringsprodukter, etc. støtte for dine strukturelle produkter, dimerer. urenhetsspektroskopistudie med strukturelle bekreftelsesdata. Velkommen til å kontakte oss.

Tirzepatide (Tirzepatide) er GLP-1/GIP dobbel agonisten som Eli Lilly kom opp med, og den har vært i full gang disse to årene. Det har en god effekt av å senke sukker og en sterk effekt av å redusere vekten, og kalles den oppgraderte versjonen av «mirakelmedisinen for vekttap». Innenlandske produsenter av peptid generiske legemidler, mange stirrer på det - etter utløpet av patentet, hvem kan først kjøre gjennom kvaliteten på forskning, som vil ha muligheten til å ta den første generiske.

 

Kvaliteten på tilpeptid er imidlertid ikke så lett å studere. Det er mer komplekst enn simetikon, med 39 aminosyrer, en fettsyresidekjede (eikosandisyre) og en linker. Urenhetene som kan oppstå under synteseprosessen er mye høyere enn for vanlige peptider. Manglende peptider, oksidative urenheter, fettsyreavgivende produkter, dimerer, linker-relaterte urenheter må hver ha en kontroll, hver må være tydelig.

 

Vi har samlet mye erfaring i syntese av komplekse peptidurenheter. Vi har spesialisert oss på studiet av tilpeptid, og vi vet hva som er vanskelighetene med urenhetsprofilen og hva som er de essensielle kontrollelementene. Vi kan tilpasse syntesen av ulike tilpeptid-urenhetskontroller i henhold til dine behov, med strukturbekreftelsesdata, og hjelpe deg med å etablere metoden slik at det er mindre sannsynlig at du får utstedt et supplement ved innlevering.

Den molekylære strukturen til tilpeptid bestemmer at urenhetsprofilen er mye mer kompleks enn den til generelle peptider. Når vi gjør urenhetsstudier, fokuserer vi hovedsakelig på disse kategoriene:

Mangler peptid
De 39 aminosyrene, hvorav enhver savnes under synteseprosessen, er en urenhet. Retensjonstidene til de manglende peptidene på HPLC var vidt distribuert, med forskjellig polaritet til de manglende peptidene i forskjellige posisjoner. Noen mangler ved N-terminalen, noen i midten og noen i nærheten av fettsyrefestestedet. Vi har mottatt en bestilling fra en kunde på 15 manglende peptider i forskjellige posisjoner for å lokalisere alle mulige manglende urenheter i prosessen deres.

Oksiderende urenheter
Oppfylt i sekvensen av tilpeptid er mottakelig for oksidasjon til sulfoksid og deretter til sulfon. Oksiderte urenheter vises ofte i stabilitetsstudier og vokser etter en viss tid. Vi har gjort en sammenligning, under akselererte forhold i en måned kan oksidasjonstoppen vokse til mer enn 0,3 %, uten kontroll.

Fettsyreavgivende produkter
Dette er en urenhet som er unik for tilpeptid. Dens fettsyresidekjede (eikosandisyre) er festet til lysin gjennom en linker, og denne modifikasjonen kan delvis avgis under syntese eller lagring, noe som resulterer i at fettsyrer-fjerner urenheter. Mer problematisk kan utskillelsen skje på forskjellige steder - mellom fettsyren og linkeren, eller mellom linkeren og peptidet -, noe som resulterer i forskjellige urenheter. Vi har syntetisert flere fettsyrerelaterte-urenheter for kundene våre, alt fra fullstendig utskillelse til bare en liten del.

Dimerer/polymerer
To eller flere tilpeptidmolekyler klynges sammen for å danne en dimer eller høyere. Molekylvekten til dimeren er dobbelt så stor som hovedtoppen, og den er ofte en bred topp på HPLC, så den må separeres spesielt og renses før den kan brukes som kontroll. Vi har gjort klargjøring av dimerer, og det tok flere rensingsrunder for å oppnå en renhet på mer enn 95 %.

Linker-relaterte urenheter
Fettsyremodifikasjonen av tilpeptid bruker en linker (f.eks. -Glu, PEG, etc.), og denne linkeren i seg selv kan produsere sidereaksjoner under syntese, og generere urenheter med manglende eller ufullstendige linkere. Denne typen urenheter finnes ikke i vanlige peptider, men er unik for tilpeptid, som må studeres spesifikt.

Deamiderte urenheter
Asparagin (Asn) og glutamin (Gln) deamideres lett under sure eller oppvarmingsforhold, noe som resulterer i isomerer. Det er flere Asn og Gln i sekvensen til tilpeptid, og deamideringsurenheten vises ofte i tvungen nedbrytningstest, så kontrollproduktet må brukes for å lokalisere urenheten.

Diastereoisomerer
Under langkjedesyntesen kan individuelle aminosyrer gjennomgå racemisering, noe som resulterer i diastereoisomerer. Innholdet av denne typen urenheter er vanligvis ikke høyt, men eksperter vil spørre når de deklarerer, og det er bedre å ha et kontrollprodukt for bekreftelse.

Mange av disse urenhetene kan ikke kjøpes og må tilpasses syntetisert. Vi har gjort mange prosjekter for tilpasning av tilpeptid-urenheter, som dekker alle de ovennevnte kategoriene.

Slettingen av peptidserien
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 %, med MS og NMR bekreftelse. Vi har syntetisert et sett med peptider med 5 aminosyreavstand fra N-terminal til C-terminal.

Oksiderende urenheter
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95 % og vi kan gi LC-MS-spekteret for å bekrefte graden av oksidasjon. Sulfoksid og sulfon separeres med HPLC, og vi kan gjøre begge deler.

Fettsyreavgivende produkter
Dette er en av de vanskeligste urenhetene å jobbe med i tilpeptid. Fettsyrekjeden kan være helt av, eller den kan være delvis av (f.eks. mangler de siste karbonene). Vi kan syntetisere en serie varianter for ulike posisjoner i kjeden. I et av de mest kompliserte prosjektene vi har gjort, ba kunden oss syntetisere en urenhet med 8 karboner som mangler i fettsyrekjeden, og det tok oss to måneder å få det til.

Dimer
Dimerer dannet av kryss-koblinger eller ikke-kovalente interaksjoner kan fremstilles med forskjellige metoder og isoleres og renses for å gi kontroller med høy renhet. Dimerer er arbeidskrevende å rense, men vi har erfaring med å vite hvordan man skiller monomerene.

Linker-relaterte urenheter
Linkeren (-Glu, PEG, osv.) kan mangle eller være ufullstendig, noe som resulterer i en rekke relaterte urenheter. Vi kan syntetisere ulike varianter med manglende linkere, forkortede linkere eller feiltilpassede linkere, og hjelpe deg med å bygge opp spektrene til slike urenheter.

Deamiderte urenheter
For Asn- og Gln-stedene i sekvensen kan vi forberede deamiderte urenhetskontroller ved tvungen nedbrytning eller målrettet syntese. Forskjellen i molekylvekt etter deamidering er bare 1, noe som ikke er lett å skille fra MS, så vi bruker vanligvis NMR eller spesielle kromatografiske forhold for å bekrefte.

Andre tilpassede urenheter
Hvis du finner en ny ukjent urenhet i forskningen din, kan vi hjelpe deg med å analysere strukturen og syntetisere den. Send oss ​​prøvene, vi vil gjøre LC-MS-analyse, utlede strukturen, deretter retningsbestemt syntese, og deretter sammenligne retensjonstiden og massespekteret for å bekrefte samsvaret. Vi har gjort denne prosessen mange ganger og suksessraten er ganske høy.

Analytisk metodeutvikling og validering
Når du setter opp en HPLC- eller LC-MS-metode, kreves det en urenhetskontroll for lokalisering, bestemmelse av separasjon, verifisering av lineært område og gjenoppretting. Uten kontrollen mangler metodevalideringen en brikke. Mange kunder ber oss om å gjøre noen viktige urenheter først for å sette opp metoden, og deretter sakte gjøre opp resten.

Heterogen massespektrometri
Når et generisk legemiddel er deklarert, kreves det en omfattende kvalitativ og kvantitativ analyse av prosessurenheter og nedbrytningsprodukter. Plasseringen, innholdet og strukturen til hver urenhet må bekreftes av et kontrollprodukt. Vi har sett erklæringen om informasjonen ble sendt for å fylle ut, ni ganger av ti er urenhetene i dette stykket ikke forsto.

Stabilitetsstudier
I langsiktig-stabilitet og akselererte tester er det nødvendig å fastslå hvilke nedbrytningsprodukter som er dominerende og hva trenden i innhold er. Med urenhetskontrollen kan vi kvantifisere og overvåke nøyaktig. En kunde gjorde stabiliteten til tilpeptidpreparatet, og fant ut at en nedbrytningstopp vokste veldig raskt under akselererte forhold, så vi analyserte og syntetiserte den av MS for å bekrefte strukturen, og så ble kunden lettet over å rapportere det.

Batchutgivelsestesting
Etter kommersialisering må hver batch av API eller formulering testes for det aktuelle stoffet. Urenhetskontroller er viktige verktøy for utgivelsestesting.

Informasjon om generiske legemiddeldeklarasjoner
Urenhetsstudier er en nøkkeldel av arkiveringsinformasjonen. Ved å gi fullstendig urenhetsprofilering og kontrolldata reduseres risikoen for en anmeldelse betydelig.

Tilfelle 1: et farmasøytisk selskap, tilpeptid generisk legemiddelprogram
De utvikler en generisk versjon av tilpeptid og trenger et komplett sett med urenhetskontroller for metodevalidering. Vi tilpasset 12 urenheter for dem: 5 manglende peptider, 2 oksiderte urenheter, 1 dimer, 2 fettsyreavgivende produkter og 2 linker-relaterte urenheter. Hver av dem har en renhet på mer enn 95 %, og er ledsaget av MS- og NMR-data. Prosjektlederen sa: "Urenhetene i tilpeptid er dobbelt så mange som andre peptider, men du kan lage dem alle, og dataene er fullstendige, noe som sparer oss for mye arbeid." Senere ble valideringen av metoden deres fullført, og nå forbereder de seg på erklæringen.

Case 2: Et CRO-selskap, urenhetsprofilering
De gjennomførte et kvalitetsforskningsprosjekt på tilpeptid, som krevde en omfattende analyse av prosessurenheter. De sendte oss råpeptidprøvene, og vi utførte LC-MS-analyse, utledet de mulige strukturene til flere ukjente urenheter, syntetiserte dem deretter på en målrettet måte, og sammenlignet retensjonstider og massespektre, og bekreftet fire nye urenheter - to av dem var linker-relaterte, og to av dem var varianter av fettsyreavgivelse. Klienten brukte disse dataene til å avgrense urenhetsprofilene og bestod klientens aksept.

Case 3: Stabilitetsstudier, et bioteknologiselskap
De undersøkte stabiliteten til en tilpeptidformulering og fant at mengden av et nedbrytningsprodukt økte raskt under akselererte forhold, men de visste ikke hva det var. Vi analyserte prøven av LC-MS og antok at det var en deamideringsurenhet på et bestemt Asn-sted, og syntetiserte den deretter på en målrettet måte og bekreftet den ved sammenligning. De etablerte en analyse ved å bruke denne kontrollen og overvåket nøyaktig trenden til nedbrytningsproduktet. Senere, da de leverte rapporten, ble denne delen av dataene vektlagt av de sakkyndige, og på grunn av de solide dataene ble det ikke utstedt noen erstatning.

Tilpeptid er et populært produkt, men urenhetsundersøkelse er en delikat jobb, spesielt fettsyreeksfolieringsprodukter og linker-relaterte urenheter, som mange produsenter ikke kan håndtere. Hvis du driver med kvalitetsforskning eller generisk utvikling av tilpeptid og trenger urenhetskontroll, kan du gjerne kontakte oss. Vi har gjort mye arbeid, vi vet hva som er vanskelighetene, og vi vet hvordan vi skal løse det.